В данном исследовании представлен новый высокочувствительный подход к определению восьми стероидных сапогенинов – гекогенина, неорускогенина, рускогенина, гитогенина, диосгенина, сарсапогенина, ямогенина и тигогенина с использованием исчерпывающей двумерной высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией в режиме мониторинга заданных реакций. Исследованы особенности ионизации сапогенинов в условиях химической ионизации при атмосферном давлении с регистрацией положительно заряженных ионов. Изучены тандемные масс-спектры выбранных ионов-предшественников, а также основные направления их диссоциации, активированной соударениями. Сочетание двумерного хроматографического разделения и масс-спектрометрического детектирования позволило разработать методику одновременного определения стероидных сапогенинов с пределами обнаружения от 0.7 до 2.9 мкг л-1. Разработанный подход был валидирован и апробирован при анализе экстрактов растений богатых стероидными сапонинами, такими как Юкка славная, Юкка трекуле, Юкка нитчатая и Юкка алоэлистная.