江苏省某种鹅场15日龄雏鹅疑似感染鸭疫里氏杆菌,无菌采取脑、心脏、肝和脾等病料,进行病原分离纯化,通过细菌生化试验、血清型鉴定及设计特异性扩增鸭疫里氏杆菌外膜蛋白A(OmpA)基因的引物,进行PCR扩增,从8份病料中分离到2株血清2型鸭疫里氏杆菌.药物敏感性试验表明,2个分离株对红霉素和阿奇霉素的敏感性高于其他药物.对OmpA基因PCR产物进行基因序列测定,在NCBI上进行基因序列同源性比对,其基因序列与多株已发表的序列的同源性达到99％.进化分析表明,分离株均与D2、G2株具有很近的亲缘关系.

为构建新型H7亚型禽流感HA基因的原核表达载体，并在大肠杆菌中进行表达。从NCBI数据库下载H7亚型禽流感HA全基因序列，合成HA基因；定向克隆到原核表达载体pET－32a（＋）的多克隆位点中，构建重组原核表达质粒 pET －32a（＋）－HA；转化入大肠杆菌 BL21（DE3）中经 IPTG 诱导表达，表达产物经 SDS －PAGE 和Western－blot法鉴定。结果显示，重组质粒经双酶切及基因测序鉴定构建正确；重组的HA融合蛋白约为84 ku，大小与预期融合蛋白大小一致；重组HA融合蛋白可以与His标签单克隆抗体特异性结合，与H7阳性血清有较强的反应原性。成功构建了HA基因原核表达载体，并在大肠杆菌BL21（DE3）中获得重组HA融合蛋白表达。