PTEN通过抑制PI3K-AKT信号通路上调Rad51基因的表达

前期研究发现pten缺陷细胞的自发DNA双链断裂损伤水平显著增加.本研究探讨了抑癌基因pten对参与DNA同源重组修复的rad51基因表达的影响和机制.用实时定量PCR技术检测了PTEN野生型和缺陷型细胞rad51的表达水平.结果发现,PTEN缺失会导致rad51的表达降低.PI3K激酶为PTEN的下游负调节靶分子,使用PI3K激酶抑制剂LY294002处理缺陷型细胞后,其rad51表达升高.在PTEN野生型细胞中分别转染Flag-Akt WT(野生型)和Flag-Akt AC(组成型激活),或在PTEN缺陷型细胞中分别转染野生型PTEN和Akt-DN(失去激酶活性的Akt).利用RT-PCR技术检测上述细胞rad51的表达水平,同时利用Western印迹检测上述细胞RAD51蛋白的表达水平.结果发现,转染Flag-Akt WT和Flag-Akt AC后,均能促使PTEN野生型细胞中rad51在mRNA和蛋白水平降低;在PTEN缺陷型细胞中转染野生型PTEN或Akt-DN后,rad51在mRNA和蛋白水平均升高.在PTEN缺陷型细胞中使用siRNA沉默akt后,同样导致RAD51表达升高.结果提示,PTEN可以正向调节RAD51基因表达,PI3K/Akt是其信号通路机制之一.