蓝舌病病毒单克隆抗体的制备与生物学特性的鉴定

用纯化的蓝舌病病毒(BTV)免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA方法筛选,有限稀释法克隆,获得2株稳定分泌抗BTV特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1F5和4E5)。其细胞培养上清ELISA效价分别为1∶512和1∶256,腹水ELISA效价分别为1∶512 000和1∶128 000。亚型鉴定表明,1F5和4E5分别为IgG1和IgG2a。ELISA结果显示,2株单克隆抗体仅与BTV反应,不与其他相关病毒反应,表明2株单克隆抗体特异性良好。2株单克隆抗体1F5和4E5的相对亲和力指数分别为5.14×106mol/L和6.71×106mol/L。这2株单克隆抗体的获得为建立BTV免疫学检测方法奠定了基础。