先天性QT间期延长综合征相关基因SCN5A定点突变及蛋白表达研究
Zhongguo dang dai er ke za zhi = Chinese journal of contemporary pediatrics（2013）
摘要
目的 构建先天性QT间期延长综合征相关基因SCN5A-delQKP1507-1509突变型真核表达载体,并观察其在人胚肾293(HEK293)细胞中的表达.方法 采用一步法构建SCN5 A-delQKP1507-1509突变型真核表达载体PEGFP-delQKP-hH1,用脂质体转染法将野生型和突变型质粒分别转染HEK293细胞,激光共聚焦显微镜观察钠通道蛋白在HEK293细胞的表达与定位,Western blot检测其蛋白表达.结果 经电泳及DNA测序显示突变型1507-1509位点成功缺失9个碱基,野生型与突变型均在HEK293细胞膜上表达,且表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 成功构建钠通道基因SCN5 A-delQKP 1507-1509突变型真核表达载体,并在HEK293细胞中表达,为进一步研究其功能奠定基础.
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关键词
Congenital long QT syndrome,Eukaryotic expression vector,Human embryonic kidney 293 cell,SCN5A gene,Site-directed mutagenesis
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