多细胞生长因子联合作用软骨块修复关节软骨缺损的实验

目的:观察β-成纤维细胞生长因子、β1-转化生长因子和骨诱导形成蛋白-6多种细胞生长因子联合构建改良纤维蛋白胶支架软骨膜块修复关节软骨缺损的作用.方法:实验于2004-12/2005-06在南方医科大学附属珠江医院骨科医学中心及珠江医院中心实验室完成.采用健康新西兰大白兔49只,其中3周龄新西兰大白兔1只,余均为3个月龄左右.取3周龄新西兰大白兔自体软骨细胞进行体外培养后移植于改良纤维蛋白原支架上进行体外培养,分成生长因子培养组、单纯支架细胞组、单纯支架组及空白组;并将所培养的软骨细胞模块随机分布种植于48只3个月龄新西兰大白兔软骨缺损模型内,12只/组,进行动物体内培养2～12周;体外培养观察细胞生长情况,分别于体内培养2、6、12周处死大白兔,对软骨膜块进行组织学观察和组织工程学评分.结果:48只大白兔均进入结果分析.①体外培养:单纯细胞支架组细胞倍增时间为5.0 d,多种细胞生长因子培养系统组为3.8 d,两组细胞生长速度有明显差别.②体内培养:细胞生长因子组修复软骨与邻近软骨整合紧密、厚度较一致、细胞数量最多,具有良好的分泌基质能力;单纯细胞支架组细胞软骨与邻近软骨整合欠佳、厚度稍差、细胞数量较正常少,具有一定的分泌基质能力;单纯支架组为纤维组织覆盖;完全空白组内为一松散的纤维疤痕组织敷盖及部分炎性细胞的存在.组织工程学评分细胞生长因子组明显好于单纯细胞支架组[空白组(10.94±1.77)分,单纯支架组(9.38±1.89)分,细胞支架组(7.31±1.54)分,生长因子组(3.81±1.10)分,各组之间相比P＜0.01].多细胞生长因子用于构建软骨膜块修复关节软骨缺损模型可促进种子细胞增殖和组织工程软骨膜块的形成.结论:多细胞生长因子作用于改良纤维蛋白胶软骨膜块中可明显促进组织工程软骨膜块构建以及关节软骨缺损的修复.