抑癌基因Runx3增强顺铂致肝癌细胞的凋亡效应

目的:探讨腺病毒介导的Runx3基因(Ad-Runx3)与化疗药物顺铂(DDP)联合应用对肝癌细胞HLE增殖的抑制效果.方法:检测肝癌细胞HLE中Runx3基因启动子区域甲基化状态及表达情况.通过Ad-Runx3感染肝癌细胞HLE,利用RT-PCR方法检测Runx3基因在肝癌细胞中的转录,用Ad-Runx3联合化疗药物顺铂处理培养的肝癌细胞HLE,利用Western-blot法检测RUNX3在肝癌细胞中高效表达,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率.结果:在肝癌细胞HLE中Runx3基因启动子区域存在甲基化异常,R-TPCR 结果证实HLE中Runx3基因不表达;Ad-Runx3感染HLE细胞后,RT-PCR结果显示有目的基因的转录,并在感染48 h后,RUNX3高效表达.MTT结果显示,100 MOI Ad-Runx3与6.25 mg/L DDP联合应用后5 d,HLE细胞增殖抑制率达(92.46±1.13)%,显著高于单用Ad-Runx3组的(59.28±1.37)%和DDP组的(46.37±2.51)%(均P＜0.05).流式细胞术结果显示,Ad-Runx3与DDP联合应用明显导致细胞S期减少,G2/M期阻滞; Ad-Runx3联合DDP组细胞凋亡率为(18.62±2.48)%,显著高于单用Ad-Runx3组的(8.66±0.78)%和DDP组的(7.48±0.32)%(均P＜0.05).结论:Ad-Runx3与DDP联合应用能显著提高对肝癌细胞HLE增殖的抑制作用.