Evolution of H9N2 influenza viruses isolated in Shandong Province

利用生物信息学方法和血凝交叉抑制(HI)试验比较研究了山东地区低致病性禽流感H9N2亚型病毒的分子遗传变异和抗原性变化. 对1999~2013年在山东地区分离并鉴定的35株H9N2病毒进行了 HA 基因测序和同源性分析, 绘制了系统发育树. 同源性比较显示, 同一时期的毒株同源性较高, 而不同年代的H9N2流行毒相差较大, 如2010~2013年的H9N2流行毒之间核苷酸(氨基酸)同源性为94.5%~100%(96.1%~100%), 但与疫苗株SD-6的核苷酸(氨基酸)同源性已降至90.0%~92.5%(91.8%~95.0%). 系统发育树显示, 35株H9N2病毒均属欧亚谱系, 其中28株属于S2-like亚群, 表明该类型毒株是山东地区最主要的流行株. 重要氨基酸位点分析表明, 2010年以后的H9N2流行毒, 其HA蛋白裂解位点基序为PSRSSR↓GL, 334位点均由原来的A变为S; 与受体结合位点相关的234位点, 则由Q变为L. 选择不同亚群的H9N2代表毒株制备单因子血清, 进行HI交叉抑制实验, 结果发现, H9N2不同毒株之间均可发生一定的交叉反应, 但相关指数最低已降至0.31, 表明病毒已出现明显的抗原性变化. 本研究证实, 山东H9N2亚型禽流感病毒在分子和抗原水平上均已发生一定程度的变异.