P182: Régime hyperprotéique, sulfure d’hydrogène bactérien et cellules épithéliales coliques : les liaisons dangereuses

Introduction et but de l’etude Les regimes hyperproteiques (HP) modifient le contenu intestinal en metabolites bacteriens derives des acides amines. Parmi ceux-ci, le sulfure d’hydrogene (H 2 S) est connu comme perturbateur du metabolisme energetique des cellules epitheliales coliques lorsqu’il est present en exces. Des etudes realisees in vitro ont montre que ce metabolite est aussi susceptible d’exercer des effets genotoxiques sur colonocytes. Notre etude avait pour but de determiner i. les effets d’un regime hyperproteique chez le rat sur les concentrations du H 2 S dans le gros intestin et sur l’expression des enzymes impliquees dans sa detoxication, ii. de caracteriser les effets du H 2 S sur la respiration des colonocytes et iii. de mesurer les effets de l’instillation luminale in vivo de H 2 S sur l’expression de genes associes a l’inflammation dans les colonocytes. Materiel et methodes Des rats ont ete nourris pendant 2 semaines avec un regime HP (53 % de proteines) ou un regime normoproteique (NP, 14 % de proteines) isocalorique. Les concentrations de H 2 S ont ete mesurees par GC-MS dans les contenus intestinaux. L’expression genique des enzymes de detoxication de H 2 S dans les colonocytes isoles a ete mesuree par q-PCR. Apres instillation luminale d’une solution de NaHS (donneur de H 2 S) dans le colon pendant 1h sur des rats anesthesies, l’expression genique et les caracteristiques respiratoires des colonocytes ont ete determinees. Les effets du NaHS sur la respiration de colonocytes en presence ou en absence d’un autre perturbateur metabolique, le NO, ont egalement ete etudies. Resultats et Analyse statistique Nous avons mesure des concentrations millimolaires de H 2 S dans les contenus du gros intestin. Chez les animaux HP, le gene codant pour la premiere enzyme de detoxication du H 2 S (SQR) etait plus exprime que chez les rats NP (p  2 par les colonocytes de rats non traites etait stimulee de maniere pH-depen-dante par 20 et 40 μ M de NaHS (p  2 S. Par contre, des concentrations plus elevees (0,5 et 1,5 mM) inhibaient la respiration (p  2 par les colonocytes etait inhibee par un donneur de NO (20 μM) (p  2 induite par 20 μM de NaHS (p  2 S etait limitee dans ces conditions. Enfin, les experiences d’instillation luminale de NaHS suggerent une reversion rapide des effets du H 2 S sur la respiration des colonocytes. Conclusion La consommation d’un regime riche en proteines est associee a une adaptation limitee de l’expression genique du systeme enzymatique de detoxication du H 2 S dans les colonocytes. De plus, le H 2 S est capable de fortement stimuler l’expression de la iNOS, une enzyme surexprimee dans les maladies inflammatoires intestinales. Le NO en exces semble restreindre les capacites des colonocytes a oxyder le H 2 S, une situation qui perturberait fortement les capacites des colonocytes a detoxifier ce metabolite bacterien.