O17: Effets de la dénutrition sur l’expression des récepteurs TLR4 et sur la réponse inflammatoire au niveau colique dans un modèle d’anorexie chez la souris

Introduction et but de l’etude L’anorexie mentale est un trouble du comportement alimentaire d’origine multifactorielle, dont la physiopathologie reste mal connue. Des etudes experimentales et cliniques suggerent des modifications de la composition du microbiote et de la permeabilite intestinale. De plus, les recepteurs de la famille Toll-like (TLRs) sont des acteurs majeurs dans la reponse intestinale aux modifications du microbiote. Le but de cette etude est d’evaluer la permeabilite intestinale et l’expression de TLR4 dans la physiopathologie de l’anorexie chez l’animal. Materiel et methodes Des souris femelles C57bl/6 ont ete reparties en 3 groupes : controle (CT) avec alimentation ad libitum (n = 8), LFA avec acces limite a l’alimentation (n = 8) et ABA avec acces limite a l’alimentation et activite physique sur roue (n = 8). Apres 5 jours d’acclimatation, pour les groupes ABA et LFA, l’acces a l’alimentation a progressivement ete limite de 6h/j a J6 jusqu’a 3h/j a J9, jusqu’a la fin de l’etude. A J10 et J17, des segments de colon ont ete prelevees. La permeabilite intestinale a ete mesuree en chambre de Ussing. L’expression de TLR4 a ete analysee par cytometrie en flux et immunofluorescence et le taux des ARNm codant pour TLR4, TNFα, IL-1β, IL-10, IL-4 et IL-6 par PCR en temps reel. Les resultats (moyenne ± ecart-type moyen) ont ete compares par un test de Mann-Whitney ou de Kruskal-Wallis avec un seuil de significativite fixe a P Resultats et Analyse statistique La permeabilite paracellulaire intestinale n’etait pas modifiee a J10 et J17. En revanche, a J10, le taux des ARNm de TLR4 etait plus eleve chez les ABA vs CT (ABA : 0,65 ± 0,18, C : 0,30 ± 0,19, *p = 0,006) et a J17, dans les 2 groupes ABA et LFA (ABA :0,56 ± 0,30, LFA : 0,70 ± 0,20, CT :0,22 ± 0,17, *p = 0,028 et *p = 0,0041). A J17, dans les groupes ABA et LFA, une augmentation de l’expression de TLR4 etait egalement observee a la surface des cellules epitheliales intestinales (ABA :45,8 ± 5,4, LFA : 51,0 ± 3,6, CT : 16,9 ± 2,9, *p = 0,0013 et *p = 0,0007) et a la surface des macrophages (ABA :40,9 ± 3,7, LFA :38,3 ± 2,5, CT:22,9±4,2, *p = 0,02 et *p = 0,04). Concernant le taux des ARNm codant pour IL-1(3, IL-4 et IL-6, aucune difference n’etait observee entre les 3 groupes a J10 et a J17. Le taux des ARNm de l’IL-10 etait augmente dans le groupe ABA a J10 (P Conclusion Nos resultats montrent une augmentation de l’expression des recepteurs TLR4 au niveau de la muqueuse colique, et en particulier au niveau de la membrane des cellules epitheliales et des macrophages, probablement secondaire a la denutrition. L’expression augmentee de TLR4 a la surface des cellules epitheliales pourrait modifier la sensibilite de ces cellules aux lipo-polysaccharides bacteriens. Une reponse inflammatoire muqueuse semble egalement presente.