二甲基甲酰胺对大鼠肝脏抗氧化能力及PPAR mRNA的影响

目的 研究灌胃给予二甲基甲酰胺(DMF)对大鼠肝脏抗氧化能力及过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)α和PPARγ的影响.方法 30只雄性8周龄SPF级SD大鼠随机分组,经口灌胃给予DMF 150 mg/kg BW染毒(每组5只),分别在DMF暴露前(D0组),暴露后第1、3、7、14和28天,取外周血进行血常规分析;处死大鼠取肝脏组织,HE染色进行病理观察;试剂盒检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及过氧化氢酶(CAT)的水平;采用实时荧光定量PCR方法检测PPARα和PPARγ的mRNA水平;ELISA检测肝脏促炎症细胞因子白介素-1 β(IL-1 β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果 与D0天(对照组)相比,DMF暴露1天后外周血白细胞水平开始增加[(8.30±0.61)×109/L vs.(12.64±1.02)×109/L,P＜0.05],随着暴露时间延长,白细胞水平进一步升高.此外,DMF暴露后可引起显著的肝脏损伤,包括肝细胞肿胀、淋巴细胞浸润、点状坏死等.与D0天相比,GSH-Px在DMF暴露后第一天出现一过性升高[(1006.00±168.60)U vs.(1437.00±321.00)U,P＜0.05],CAT在DMF暴露后28天出现显著升高[(35.17±4.90) U/mg蛋白vs.(51.80±10.32)U/mg蛋白,P＜0.05].PPARα和PPARγ的mRNA水平在染毒后第7天出现显著升高[(1.35±1.30)vs.(35.70±10.88),(1.04±0.33) vs.(191.10±44.70),P＜0.01].而PPAR信号通路下游促炎症细胞因子水平(IL-1 β、IL-6和TNF-α)降低,其中,与D0天相比,IL-1β在DMF暴露28天显著降低[(34.75±5.94) pg/mL vs.(25.52±1.65)pg/mL,P＜0.05],IL-6在DMF暴露14天降低至谷值[(139.10 ±23.10)pg/mL vs.(97.86±4.15) pg/mL,P＜0.01],TNF-α在DMF暴露后持续降低,在暴露28天时最低[(295.40±29.31) pg/mL vs.(217.10±7.43),P＜0.01].结论 DMF代谢过程中产生大量ROS,可引起氧化应激能力损伤,导致肝脏炎症,从而负反馈上调PPAR的转录水平,抑制促炎症细胞因子分泌,以减轻炎症反应.