下调SPOCK1基因表达可抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭

Tumori(2017)

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摘要
目的:检测膀胱癌细胞中SPOCK1(sparc/osteonectin,cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1)基因的表达情况,并进一步研究下调SPOCK1基因表达对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1以及膀胱癌细胞株5637和T24中SPOCK1基因的表达情况.构建特异性针对SPOCK1基因的siRNA片段,并将其通过脂质体介导转染至膀胱癌5637细胞;同时设立未转染的空白对照组和转染无义序列的阴性对照组.采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组细胞中SPOCK1 mRNA和蛋白的表达差异.然后采用CCK-8法、划痕愈合实验和Transwel1小室法分别检测SPOCK1基因表达下调后膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化情况.结果:膀胱癌细胞中SPOCK1基因表达水平高于输尿管上皮永生化细胞,尤以膀胱癌5637细胞中的表达水平最高(P值均< 0.05).SPOCK1 siRNA转染后,膀胱癌5637细胞中SPOCK1基因的表达明显下调(P<0.05),而膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力均被明显抑制(P值均< 0.05).结论:膀胱癌细胞中SPOCK1基因存在过表达现象.下调SPOCK1基因表达可以降低膀胱癌5637细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
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关键词
Urinary bladder neoplasms,RNA interference,Cell proliferation,Cell movement,Gene,SPOCK1
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