Obtaining and evaluation of enzymatic extract from Aspergillus spp. by saccharification of sour cassava starch liqued

espanolComercialmente las enzimas de sacarificacion son mas costosas que las de licuefaccion, por tal razon se buscan estrategias que permitan el suministro de estas enzimas a bajo costo. Los objetivos de este estudio fueron evaluar extractos enzimaticos sacaroliticos a partir de cepas nativas, seleccionar un extracto y determinar las mejores variables para la produccion de jarabes de glucosa. Para ello, en trece hongos filamentosos aislados de yuca amarga Manihot sp. fueron evaluadas la actividad sacarolitica, la hidrolisis de maltosa, la produccion de glucosa y la formacion de biomasa bajo condiciones de fermentacion sumergida. El aislamiento identificado como Aspergillus A1 fue seleccionado por presentar la mas alta actividad volumetrica (0,09UI.L-1). Durante la fermentacion en estado solido se corroboro la presencia de proteinas mediante el metodo de electroforesis SDS-PAGE y se evidencio una banda de mayor intensidad con peso molecular entre 60 y 70 kDa. Para el extracto enzimatico de Aspergillus A1 se determino que las mejores condiciones experimentales de sacarificacion, con el uso de maltosa como sustrato, fueron pH 4,0, temperatura 55,0 °C, y sin agitacion. Igualmente en la evaluacion del efecto de los cofactores Cu2+, K+, Mg2+ y Na+ en concentraciones de 1 mM, se observo que todos incrementan la actividad enzimatica especialmente el Mg2+ , el cual la aumenta en 1,32 UI.mg-1 (32,4%). La estabilidad termica de la proteina a 55,0°C fue de 120 minutos. La capacidad sacarolitica del extracto enzimatico fue confirmada usando como sustrato almidon de yuca amarga licuado. EnglishThe saccharification enzymes are more expensive than liquefaction enzymes for that reason are sought strategies that allow the supply of these enzymes at low cost. The objectives of this study were to evolve saccharolytic enzymatic extracts from native strains, to select an extract and to determine the best variables for the production of glucose syrups from liquefied bitter cassava starch.Thirteen mushrooms isolated from sour cassava (Manihot sp). were evaluated for their saccharolytic activity, hydrolysis of maltose, glucose production and biomass formation in submerged fermentation. Aspergillus A1 was selected because it had the highest volumetric activity (0.09UI.L-1). During solid-state fermentation, the presence of proteins was corroborated by electrophoresis SDS-PAGE. Through various experiments, the best experimental condition were pH 4.0, agitation 0r.p.m and temperature 55.0°C; the effect of cofactors Cu2+, K+, Mg2+ and Na+ was evaluated, Mg2+ increases the activity in 1.32UImg-1 (32.4%). The thermal stability at 55.0°C is 120 minutes. Finally, the saccharolytic capacity of the enzymatic extract was confirmed using liquefied cassava starch. portuguesComercialmente as enzimas de sacarificacao sao mais custosas do que as de liquefacao, por esta razao procuram-se estrategias que permitam fornecer este tipo de enzimas a baixo custo. Os objetivos deste estudio foram avaliar extratos enzimaticos sacarolīticos de cepas nativas, selecionar um extrato e determinar as melhores variaveis para a producao de xaropes de glicose. Para isto, de treze fungos filamentosos isolados de mandioca amarga Manihot sp., foram avaliadas a atividade sacarolitica, a hidrolise de maltose, a producao de glicose e a formacao de biomassa em condicoes de fermentacao submersa. O isolamento Aspergillus A1 foi selecionado por apresentar a maior atividade volumetrica (0,091UI.L-1). Durante a fermentacao em superficie a presenca de proteinas foi confirmada pelo metodo de eletroforese de SDS-PAGE junto com uma banda de maior intensidade com peso molecular entre os 60 e 70kDa. Para os preparados enzimaticos de Aspergillus A1 determinou-se que as melhores condicoes experimentais de sacarificacao usando maltose como substrato foram pH 4,0, temperatura de 55,0°C, sem agitacao. Igualmente na avaliacao do efeito dos cofatores Cu2+, K+, Mg2+ e Na+ em concentracoes de 1 mM, observou-se que todos incrementam a atividade enzimatica principalmente o Mg2+ em 1,32UI.mg-1 (32,4%) em relacao ao controle. A estabilidade termica da proteina de 55,0°C e de 120 minutos. A capacidade sacarolitica do extrato enzimatico foi confirmada usando substrato hidrolisado de mandioca amarga.