联合沉默HER2和TFF3基因表达抑制胃癌NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 :探讨沉默人表皮生长因子受体2 (human epidermal growth factor receptor 2, HER 2) 基因对人胃癌NCI-N87细胞中三叶因子3 (trefoil factor 3, TFF3) 表达的影响, 并探讨联合抑制HER2和TFF3表达对NCI-N87细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:通过CCLE (Cancer Cell Line Encyclopedia) 数据库获取38株不同胃癌细胞株中HER2与TFF3 mRNA的表达水平并分析其相关性.采用脂质体法将特异性针对HER 2基因的siRNA以及过表达质粒转染至人胃癌NCI-N87细胞中, 应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法分别检测转染HER2-siRNA和HER2过表达质粒后NCI-N87细胞中HER2 mRNA和蛋白的表达水平, 以及TFF3 mRNA与蛋白表达水平的变化;采用CCK-8法和Transwell小室法分别检测单独以及联合转染HER2-siRNA和TFF3-siRNA对NCI-N87细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结果:38种不同胃癌细胞株中HER2和TFF3 mRNA的表达水平呈负相关性 (γ=-0.24, P=0.049);转染HER2-siRNA后, 与阴性对照组相比, NCI-N87细胞中HER2 mRNA和蛋白表达水平均明显下调 (P值均＜0.05), 而TFF3 mRNA和蛋白表达水平随之出现上调 (P值均＜0.05);转染HER 2基因过表达质粒后, NCI-N87细胞中HER2 mRNA和蛋白表达水平均明显上调 (P值均＜0.05), TFF3 mRNA和蛋白水平则呈下降的趋势, 但差异无统计学意义 (P值均＞0.05);联合转染HER2-siRNA和TFF3-siRNA较单独转染HER2-siRNA或TFF3-siRNA能更显著地抑制NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭 (P值均＜0.05) .结论:HER2与TFF3在不同胃癌细胞株中的表达呈负相关性;沉默HER 2基因表达能诱导NCI-N87细胞中TFF3表达水平上调;联合拮抗HER2和TFF3的表达能够协同抑制NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭.