补肾健脾活血方含药血清提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性

背景:有研究发现中药可以通过Wnt/β-catenin信号通路影响成骨细胞,而Sost是Wnt信号通路的抑制因子和骨形成中的抑制蛋白,也是一种调控骨分化的拮抗因子,可调控成骨细胞的分化和增殖。补肾健脾活血方是广州中医药大学附属骨伤科医院临床防治骨质疏松症的经验方,对骨形成有促进作用,治疗骨质疏松症疗效显著。目的:应用补肾健脾活血方含药血清干预过表达骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)重组腺病毒转染的成骨细胞,观察其对细胞增殖、碱性磷酸酶活性和相关蛋白的影响。方法:将培养好的成骨细胞分为空白对照组、过表达Sost组(Ad-Sost组)2组,空白对照组给予空载腺病毒转染,Ad-Sost组予过表达Sost重组腺病毒转染,两组分别给予空白血清和含药血清干预,采用CCK-8检测细胞增殖、碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性,Western Blot检测骨调节蛋白表达情况。结果与结论:(1)与空白血清干预比较,两组含药血清在24,48,72 h均可以提高细胞活性(P均<0.01);(2)与空白血清干预比较,两组含药血清均可以提高碱性磷酸酶活性(P<0.01);(3)与空白血清干预比较,空白对照组含药血清可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白的表达(P均<0.01),对骨桥蛋白、肿瘤坏死因子α蛋白的表达无明显影响,Ad-Sost组含药血清也可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白蛋白的表达(P均<0.01),提高肿瘤坏死因子α蛋白的表达(P<0.01);(4)结果说明,补肾健脾活血方含药血清可以提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性,影响低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白和肿瘤坏死因子α蛋白的表达。