长链非编码RNA MALAT1吸附微小RNA-124调控MSCs成骨分化的实验研究

目的 探讨长链非编码RNA (long chain non-coding RNA,IncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1 (metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)吸附微小RNA-124 (microRNA-124,miR-124)对MSCs成骨分化的调控作用.方法 体外培养小鼠胚胎来源MSCs C3H10T1/2细胞株,随机分为对照组(A组)、lncRNA MALAT1空载质粒组(B组)、lncRNA MALAT1过表达质粒组(C组)、lncRNA MALAT1小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)组(D组)和lncRNA MALAT1 siRNA阴性对照组(E组),按细胞分组转染质粒及siRNA后再诱导其成骨分化1周,采用ALP染色和茜素红染色观察各组细胞成骨分化情况,实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测lncRNA MALAT1、Runt相关转录因子2(Runt-relatedtranscription factor2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、miR-124基因表达;采用双荧光素酶报告基因检测lncRNA MALAT1对miR-124的靶向调控关系.结果 C组ALP阳性细胞相对含量、细胞矿化结节相对含量及lncRNA MALAT1、Runx2、OPN、OCN mRNA相对表达量均显著高于其余各组,D组显著低于其余各组,差异均有统计学意义(P＜0.05);C组细胞miR-124相对表达量显著低于其余各组,D组显著高于其余各组,差异亦有统计学意义(P＜0.05);A、B、E组间各指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).双荧光素酶报告基因检测示lncRNA MALAT1靶向下调miR-124表达.结论 lncRNA MALAT1可靶向下调miR-124表达,进而促进MSCs成骨分化.