中医病证相符的大鼠心肾不交失眠模型的建立及其血清代谢组学研究

运用酶联免疫吸附法(ELISA)和代谢组学对2种心肾不交失眠动物模型进行分析比较,以期探究出一种较为理想的动物模型,并初步探讨心肾不交失眠本质.基于临床心肾不交失眠的证候特征和疾病特征,采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PC-PA)和多因素共同作用的方法复制心肾不交失眠动物模型,采用行为学观测、酶联免疫吸附法、代谢组学从多个层次对病证结合的动物模型进行评价.Wistar大鼠随机分成正常组、PCPA组、复合模型(FH)组,记录大鼠行为学、体质量、肾上腺指数、脾脏指数;利用ELISA检测血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素(ACTH)水平;采用UPLC-QE-MS检测血清中的差异代谢物信息.行为学测得FH组体质量、肾上腺指数较PCPA组均显著降低(P＜0.05);ELISA测得FH组较PCPA组ACTH,CRH显著升高;血清样本采集的数据统计经分析鉴定出9种潜在生物标志物,心肾不交失眠主要有4条代谢通路,分别是磷酸戊糖代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,组氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢.PCPA和多因素共同作用方法,均能成功复制出失眠模型,但多因素造模法与临床中医病证更为相似.采用动物行为学、酶联免疫、代谢组学能够从体外到体内、从宏观到微观、从个体到整体对心肾不交失眠大鼠模型进行综合评价.