多重荧光PCR技术快速鉴定常见15种沙门菌血清型

目的 建立快速高效的多重荧光PCR方法,用于鉴定常见15种沙门菌血清型.方法 通过沙门菌基因组比对,发现12个膜蛋白STM4497基因可有效区分常见15种沙门菌血清型,将这12个基因分别标识为A～L基因,并设计引物探针用于建立常见15种沙门菌血清型分子鉴定方法,评估其最低检出限、特异度、可重复性等指标.并以传统血清学方法作对照,采用多重荧光PCR法对206株沙门菌进行鉴定,评估新建方法的一致性.结果 多重荧光PCR法最低检出限1.1×10-3 ～ 1.2×10-3 ng/μL,特异度100％,相对标准偏差均＜2.97％.与传统血清学方法比较,新建方法的Kappa值为0.92～ 1.00.结论 建立的基于多重荧光PCR鉴定常见15种沙门菌血清型的方法快速、准确、特异性强.