白细胞介素-35调控CD4+CD25+CD127 dim/-调节性T细胞在呼吸机相关性肺炎发病中的作用

目的 观察呼吸机相关性肺炎(ventilator associated pneumonia,VAP)患者外周血和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞(regulato-ry T cells,Tregs)和白细胞介素(interleukin,IL)-35的变化,并分析IL-35对Tregs的调控在VAP发病中的作用.方法 收集23例VAP患者和11例健康志愿者(normal controls,NCs),分离外周血单个核细胞、血清和BALF,通过酶联免疫吸附试验检测IL-35水平,通过流式细胞术检测CD4+CD25+CD127dim/-Tregs比例.纯化BALF中CD4+CD25+CD127dim/-Tregs,利用重组人IL-35对纯化的Tregs刺激培养后与自体CD4+CD25-T细胞共培养,检测细胞增殖和分泌细胞因子水平.结果 外周血中Tregs的比例和血清IL-35水平在VAP患者和NCs之间差异无统计学意义.但在VAP患者中,感染部位BALF中Tregs的比例和IL-35水平较非感染部位显著升高,且BALF中Tregs的比例与IL-35水平呈显著正相关(r=0.441,P=0.035).经抗感染等综合治疗后,病情好转的患者BALF中Tregs的比例和IL-35水平较治疗前显著下降,Tregs分泌IL-35的水平亦显著下降,但病情未好转或恶化的患者BALF中Tregs的比例和IL-35水平与治疗前比较则无明显变化,Tregs分泌IL-35的水平亦无明显变化.同时,病情好转患者Tregs抑制细胞增殖能力和分泌IL-10水平均较病情未好转或恶化患者减弱.利用重组人IL-35刺激治疗前患者BALF中纯化的Tregs可增强其免疫抑制功能,主要表现为细胞增殖减弱、抑制性细胞因子(IL-35和IL-10)分泌增多以及促炎因子(IFN-γ和TNF-α)分泌减少,但是,IL-35对治疗好转患者BALF中纯化Tregs的功能无显著影响.结论 IL-35和Tregs在VAP患者BALF中显著升高,且IL-35可增强Tregs的免疫抑制功能.IL-35调控Tregs功能可能参与了VAP的发病.