硫化氢在新生大鼠高氧肺损伤中的作用

目的 探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在新生大鼠高氧肺损伤中的作用.方法 80只足月自然分娩娩出12h内的Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、高氧组、硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)+高氧组以及胱硫脒-γ-裂解酶(cystathionine-γ lyase,CSE)抑制剂——炔丙基甘氨酸(propargylglycine,PPG)+高氧组.NaHS+高氧组大鼠腹腔注射1次NaHS(90μmol/kg),PPG+高氧组注射PPG(50 mg/kg).对照组在空气中饲养,其余各组均置于持续高浓度氧(95％O2)环境中饲养.7d后,HE染色观察肺组织形态学改变,光镜下计数支气管肺泡灌洗液中白细胞计数及分类计数,采用Lowry法测定其中的蛋白含量;采用去蛋白法测定血浆中H2S含量,分光光度计检测肺组织CSE活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量.多组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验. 结果 (1)高氧组光镜下可见肺泡内出血、炎症细胞浸润;肺泡灌洗液中白细胞总数[(130.2±15.3)×107/L]、中性粒细胞数[(64.6±12.4)×107/L]及蛋白含量[(934.6±106.4) mg/L]较对照组[分别为(15.1±2.5)×107/L、(2.1±0.5)×107/L和(254.3±50.7) mg/L]升高(LSD f值分别为14.65、5.78和2.97,P值均＜0.01);血浆中H2S含量[(112.6±20.4)μmol/L]和肺组织CSE活性[(3.4±0.4) μmol/ (min·g)]较对照组[分别为(182.3±15.7)μmol/L和(6.8±1.4) μmol/ (min·g)]降低(LSD-t值分别为-9.90和-4.59,P值均＜0.01),肺组织MDA含量较对照组升高[(1.7±0.3)nmol/ml与(0.9±0.1)nmol/ml,LSD t=3.03,P＜0.01].(2)与高氧组比较,NaHS+高氧组肺组织炎性渗出及结构紊乱减轻;肺泡灌洗液中白细胞总数[(56.3±11.6)×107/L]、中性粒细胞数[(34.8±7.8)×107/L]及蛋白含量[(753.8±89.6) mg/L]均下降(LSD-t值分别为-9.66、-11.81和-5.78,P值均＜0.01);血浆中H2S含量[(235.7±32.7)μmol/L]和肺组织CSE活性[(5.8±1.1)μmol/(min·g)]均升高(LSD t值分别为11.34和5.98,P值均＜0.01).(3)与高氧组比较,PPG+高氧组光镜下肺泡炎性渗出及结构紊乱加重,肺泡灌洗液中白细胞总数、中性粒细胞数及蛋白含量升高(LSD-t值分别为5.52、6.37和8.23,P值均＜0.01);血浆中H2S含量和肺组织CSE活性降低(LSD-t值分别为-4.29和-3.97,P值均＜0.01),肺组织MDA含量升高(LSD-t=3.02,P＜0.01). 结论 H2S参与了新生大鼠高氧肺损伤的病理生理过程.外源性补充H2S可通过抑制炎症和氧化应激反应从而减轻高氧肺损伤.