内源性反转录病毒-H长末端重复关联蛋白2在人肾透明细胞癌细胞株中的表达及其生物学功能

目的 探讨内源性反转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在人肾透明细胞癌(ccRCC)细胞株786-O和ACHN中的表达及生物学功能.方法 通过使用RNA干扰(RNAi)技术构建HHLA2稳定下调表达的人肾癌细胞株786-O和ACHN,通过细胞增殖实验、划痕实验及Transwell实验观察HHLA2下调表达对人肾癌细胞株生物学行为的影响;基因芯片分析探讨人肾癌细胞株中HHLA2敲低后的差异表达基因.结果 细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验结果显示,LV-HHLA2-sh1组和LV-HHLA2-sh2组中肾癌细胞系的细胞增殖能力较LV-NC组显著降低;划痕试验结果显示划痕48 h后,LV-HHLA2-sh1及LV-HHLA2-sh2组的无细胞区域显著宽于LV-NC组(LV-HHLA2-sh1:786-O:F=99.340,P＜0.01,ACHN:F=113.5,P＜0.01;LV-HHLA2-sh2:786-O:F=35.32,P＜0.01,ACHN:F=26.47,P＜0.01);Transwell侵袭试验结果显示LV-HHLA2-sh1组和LV-HHLA2-sh2组中肾癌细胞系的细胞侵袭能力较LV-NC组显著降低;细胞周期检测结果显示HHLA2下调表达后细胞周期阻滞于G1期,同时细胞周期蛋白(Cyclin) D1、c-Myc和细胞周期蛋白E1表达减少,Cyclin D1表达水平在LV-HHLA2-sh1与LV-HHLA2-sh2组中较LV-NC组显著降低;c-Myc表达水平在LV-HHLA2-sh1与LV-HHLA2-sh2组中较LV-NC组显著降低;Cyclin E1表达水平在LV-HHLA2-sh1与LV-HHLA2-sh2组中较LV-NC组显著降低.此外,基因芯片检测结果显示,肾癌细胞系下调HHLA2表达后,上皮细胞-间充质转换标志物E-钙粘蛋白表达显著增加,N-钙粘蛋白和波形蛋白的表达显著降低.结论 HHLA2在人肾透明细胞癌细胞株786-O和ACHN中下调表达可显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力.