人胰腺星状细胞的新型分离方法

目的 探讨人胰腺星状细胞(PSCs)的新型分离方法.方法 通过gentle MACSTM组织处理器-恒温震荡消化制备正常胰腺组织、胰腺癌组织的单细胞悬液.通过密度梯度离心法分离获得静息态和活化态的PSCs.结果 通过新型的分离法,1 g人正常胰腺组织能够获得约(2.6±0.7)×106个静息态PSCs,平均活率约为90.0％,细胞形态符合典型的静息态特征,328 nm激发波长下可观察到短暂蓝绿色自发荧光;1g人胰腺癌组织能够获得约(4.1±1.1)×106个活化状态的PSCs,平均活率约为92.0％,活化态的细胞均表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)等特征性标记.结论 本研究所用新型分离方法,适用于静息态与活化态两种表型的PSCs,不但分离纯度较高,分离时间亦极大缩短,值得推广借鉴.