自噬与糖尿病因素影响缺血预处理对大鼠心肌保护作用的关系

目的 评价自噬与糖尿病因素影响缺血预处理对大鼠心肌保护作用的关系.方法 清洁级健康雄性SD大鼠,12周龄,体重290～320 g,在高脂高糖饮食喂养1周后,腹腔注射链脲佐菌素50 mg∕kg,连续2 d,制备糖尿病模型.取糖尿病模型制备成功的大鼠30只,体重350～450 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(DM-S组)、心肌缺血再灌注组(DM-IR组)和缺血预处理组(DM-IP组).另取非糖尿病大鼠30只,采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)和缺血预处理组(IP组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型.IP组和DM-IP组缺血5 min,再灌注5 min,共3个循环,行缺血预处理,然后制备心肌缺血再灌注损伤模型.再灌注120 min时,经颈内静脉采集血样,采用ELISA检测血清cTnI和CK-MB的浓度,然后处死大鼠,取心肌组织,测定心肌梗死体积,采用West-ern blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、Beclin-1、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达水平,计算p-Akt∕Akt比值.结果 与S组比较,IR组血清cTnI和CK-MB的浓度升高,心肌梗死体积百分比升高,心肌组织LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,PI3K和mTOR表达下调,p-Akt∕Akt比值降低(P<0.05).与IR组比较,IP组血清cTnI和CK-MB的浓度降低,心肌梗死体积百分比降低,心肌组织LC3Ⅱ和Beclin-1表达下调,PI3K和mTOR表达上调,p-Akt∕Akt比值升高(P<0.05).与DM-S组比较,DM-IR组血清cTnI和CK-MB的浓度升高,心肌梗死体积百分比升高,心肌组织LC3Ⅱ和Beclin-1表达上调,PI3K和mTOR表达下调,p-Akt∕Akt比值降低(P<0.05).与DM-IR组比较,DM-IP组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 糖尿病因素取消缺血预处理对大鼠心肌保护作用的机制可能与抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路激活,导致自噬增强有关.