微小RNA-195对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞周期和凋亡的影响

目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-195在体外对急性淋巴细胞白血病(ALL) Jurkat细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 将Jurkat细胞随机分为两组:阴性对照组:转染miR-mimicsmock;转染组:转染miR-195模拟物(miR-195 mimics).将人工合成的miR-195 mimics转染处于指数增殖期的Jurkat细胞,分别于24、48、72、96h时,运用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-195的表达;用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞周期;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法检测不同时间点细胞凋亡率;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果 (1)阴性对照组和miR-195 mimics转染组Jurkat细胞中miR-195 mRNA表达含量(2-ΔΔCt)在转染24、48、72、96h时分别为(1.242±0.271、1.185±0.452、1.173 ±0.324、1.375±0.582与4.483±1.014、3.422±0.543、3.152±0.784、2.454±0.171),转染组miR-195 mRNA的表达量均显著高于阴性对照组,差异有统计学意义(t=5.348,P=0.006;t=-5.484,P=0.005;t=-4.041,P=0.016;t=-3.081,P=0.037).(2)转染组细胞在转染后的24、48、72、96h4个时间点的增殖抑制率分别为(0.483±0.012)％、(0.674±0.215)％、(1.935±0.046)％和(2.348±0.082)％与阴性对照组(0.545±0.002)％、(1.228±0.057)％、(2.279士0.086)％和(3.086±0.054)％比较在4个时间点差异均有统计学意义(t=8.827,P=0.001;t =4.314,P=0.013;t =6.109,P=0.004;t=13.019,P=0.000),转染组各时间点之间比较差异具有统计学意义(F=169.495,P=0.000).(3)转染组24、48、72、96 h Jurkat细胞早期凋亡率分别为(9.873±0.641)％、(11.825±0.543)％、(20.213±0.984)％和(27.712±0.482)％,随着时间推移,Jurkat细胞凋亡数量逐渐增多(F =423.827,P=0.000).(4)转染miR-195mimic 48 h,转染组和对照组每视野平均侵袭细胞数为(97.0±15.9)个和(259.0±18.9)个,转染组与对照组比较明显降低(=11.361,P=0.000).结论 miR-195可有效抑制Jurkat细胞增殖、诱导其凋亡及抑制细胞的侵袭和转移.