基于细胞转基因平台创制抗BmNPV的细胞素材
Chinese journal of virology（2017）
摘要
家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是影响蚕业生产最为严重的病原之一,每年对我国蚕业生产方面造成很大的经济损失.通过RNA干扰技术(RNAi)干扰BmNPV的增殖关键基因可以有效地抑制病毒的增殖复制.本研究以BmNPV侵染关键基因gp64和lef-1为靶标基因,并利用病毒诱导型启动子LEF3P和39KP共构建了4种RNAi干扰表达载体,分别命名为:piggyBacA3-EGFP-39KP gp64、piggyBacA3-EG-FP-39KP-lef-1、piggyBacA3 EGFP LEF3P-gp64、piggyBacA3-EGFP-LEF3P lef-1.经瞬时转染和筛选稳定表达的家蚕细胞系抗病毒检测结果表明,通过RNAi技术能够有效的抑制病毒增殖复制,并确定了39KP启动效果优于LEF3P启动子,干扰gp64基因的抗病毒效果优于lef-1基因.这些研究结果为后期转基因品系培育和家蚕抗病毒研究提供了基础.
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