ERK/JNK信号通路在炭黑诱导细胞因子IL-6、IL-8表达改变中的作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在炭黑诱导人胚肺成纤维细胞(HELF)白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)表达改变中的作用.方法 分别在含0、15、30、60、120或240 j/mL炭黑的RPMI-1640培养液中培养HELF细胞24 h,用噻唑蓝比色法确定炭黑致HELF细胞毒性的剂量.100 μg/mL炭黑分别处理HELF细胞(炭黑组)、转染ERK显性失活突变体质粒(DN-ERK)HELF细胞(CB-DN-ERK)和转染JNK显性失活突变体质粒(DN-JNK)HELF细胞(CB-DN-JNK),同时设立不做任何处理的对照组.在染毒16 h时取炭黑组和对照组HELF细胞,采用扫描电子显微镜观察细胞的形态和是否有炭黑颗粒;在0、1、2、4、8、16、24和36 h时取炭黑组和对照组HELF细胞上清液,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测其IL-6和IL-8的表达水平;在24 h时采用ELISA法检测CB-DN-JNK和CB-DN-JNK组HELF细胞IL-6和1L-8的表达水平.结果 炭黑染毒HELF细胞16 h时未观察到炭黑颗粒,但其细胞表面突起增多.炭黑组HELF细胞在2 h(44.86±3.65 ng/L)和4h(76.52±3.15 ng/L)时的IL-6表达水平低于对照组(分别为96.78±2.82和 147.32±3.26 ng/L),而在 16 h(202.64±7.20 ng/L)、24 h(200.38±6.20 ng/L)和36 h(183.54±4.54 ng/L)时则高于对照组(分别为105.54±6.10、101.27±5.84和97.15±5.12 ng/L),差异均有统计学意义(P＜0.001);炭黑组HELF细胞在24 h(136.75±3.81 ng/L)和36 h(149.12±2.74 ng/L)时的IL-8表达水平高于对照组(分别为75.16±2.84和73.44±2.15 ng/L),差异有统计学意义(P＜0.001).与炭黑组HELF细胞相比,CB-DN-ERK和CB-DN-JNK组HELF细胞1L-6和IL-8表达水平均显著降低(P＜0.05).结论 在炭黑诱导HELF细胞IL-6和IL-8表达水平改变的过程中,ERK和JNK均正调控IL-6和IL-8表达水平.