单增李斯特菌RT-LAMP快速检测方法的建立
The Food Industry（2019）
摘要
建立一种可快速检测单增李斯特菌的反转录-环介导等温扩增方法.针对单增李斯特菌的李氏溶血素基因(hly)设计多组引物,经引物筛选和配比优化,建立检测单增李斯特菌的实时荧光RT-LAMP方法,并通过菌株特异性、灵敏度和人工污染脱脂乳样品中的检出限对该方法进行评价.该方法特异性良好,26株菌株中仅三株单增李斯特菌检出阳性;检测灵敏度高,对单增李斯特菌的菌悬液灵敏度为101 CFU/mL,是RT-qPCR方法检测灵敏度的10倍.人工污染样品直接检测的检出限为103 CFU/mL,而对样品增菌16h后,单增李斯特菌的检出限提高到100CFU/25 mL.所建立的RT-LAMP方法可以快速、准确地检测单增李斯特菌,操作简便,适合应急和现场监测使用.
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