链球菌蛋白G免疫球蛋白结合域C3区串联体的表达、筛选与初步应用
Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities（2018）
摘要
筛选并制备高效结合抗体的重组蛋白G亲和层析介质.以链球菌蛋白G C3区为结构单元,拼接形成3、4、5、6个重复C3片段的串联体,分别克隆至PET21,并在E.coli BL21 (DE3)中表达.经Ni2+纯化的重组蛋白分别偶联至Purose 4 Fast Flow制备亲和层析介质,比较介质的吸附情况,发现重组四串体对hIgG的吸附量最高,其静态饱和吸附量为66.79 mg·mL-1,动态吸附载量为35 mg·mL-1介质,优于同类型商品介质.利用该介质分离纯化小鼠腹水和人血清中的IgG,纯度在95％左右,回收率不低于80％.
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