抗重金属Cr3+单克隆抗体的研制及其免疫学特性分析

旨在研制敏感、特异、稳定的抗Cr3+单克隆抗体(Cr3+ mAb).用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cr3+形成Cr3+-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备人工免疫原Cr3+-ITCBE-BSA和检测抗原Cr3+-ITCBE-OVA,紫外扫描法(UV)、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)进行免疫原鉴定;用Cr3+-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立Cr3+ mAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cr3+ mAb,并对其免疫学特性进行分析.结果表明,免疫原制备成功,Cr3+-ITCBE-BSA中Cr3+和BSA的质量浓度分别为140.8 mg/L和5.81 g/L,筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5 3株杂交瘤细胞,其中最好的2A11G5间接ELISA效价细胞培养上清为1∶(2.56×103)、腹水为1∶(5.12×105),同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,对Cr3+的半数抑制质量浓度(IC50)为16.6 μg/L,与其他重金属离子无交叉反应.表明成功研制亲和力高、特异性强、稳定性好的Cr3+ mAb,为铬离子残留免疫学检测方法的建立奠定基础.