肠炎沙门菌调控基因hilD与hilA的体外表达规律研究

Zijian LIU,Yun CHEN, Yang LI, Kequan YIN,Lijuan XU,Chao YIN,Jie XIA,Xiaolei XIE,Qiuchun LI,Zhiming PAN,Xinan JIAO

Journal of Yangzhou University(Agricultural and Life Science Edition)（2016）

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摘要

利用原核表达载体pCold Ⅰ构建肠炎沙门菌转录调控蛋白HilD和HilA的重组表达菌,并采用Western-blot技术检测两者在体外培养条件下的表达规律.结果表明:成功构建了重组表达大肠埃希菌(E.coli) BL21(pCold Ⅰ-hilD)和E.coli BL21(pCold Ⅰ-hilA),经IPTG诱导得到了重组表达的rHis-HilD和rHis-HilA蛋白.将重组表达的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备蛋白的多克隆抗体,Western-blot进一步证明了抗体与蛋白可发生特异性反应.肠炎沙门菌C50041在LB培养条件下,HilD与HilA蛋白表现出不同的表达规律,从而为体外研究肠炎沙门菌SPI1与SPI2效应蛋白的表达和功能研究奠定了基础.

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