神经介素U在体外对猪树突细胞活性及功能的影响

[目的]本文旨在探讨不同浓度神经介素U(NMU)对外周血单核源树突细胞(DC)刺激T淋巴细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响.[方法]采集小梅山猪外周血,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导外周血单核细胞形成未成熟树突细胞,再加入脂多糖(LPS)刺激获得成熟的树突细胞,同时观察DC形态.加入不同浓度(0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L-1)NMU并分别培养2、4、8和12 h后,收集细胞上清液,用ELISA法测定IL-4、IL-5和IL-13的浓度.加入不同浓度(0.1、1、10、100、1 000 nmol·L-1)NMU培养24h后,收集细胞,用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒分别检测DC刺激混合淋巴细胞时细胞的增殖和DC凋亡率.[结果]NMU(0.1～100 nmol·L-1)能够抑制未成熟树突细胞(iDC)的细胞凋亡(P＜0.01),且NMU与NMU+LPS作用效果相一致,10 nmol· L-1NMU组与10 nmol·L-1 NMU+LPS组都能降低iDC凋亡,凋亡率分别为2.383％和2.360％,与LPS组相比,NMU+LPS组抑制iDC细胞凋亡效果极显著(P＜0.01),说明NMU与LPS协同发挥抑制iDC细胞凋亡作用;与对照组相比,0.1 ～ 100 nmol·L-1NMU能极显著促进mDC分泌IL-5(P＜0.01)和抑制IL-4分泌(P＜0.01).NMU对IL-13的影响呈现多样性,低剂量(0.01～0.1 nmol·L-1)NMU在2、4h抑制mDC细胞分泌IL-13(P＜0.05),中剂量(1～ 10 nmol·L-1)NMU在2h先抑制mDC分泌IL-13 (P＜0.05),4h后又促进其分泌(P＜0.05),高剂量(100～1 000 nmol·L-1)NMU则促进mDC分泌IL-13(P＜0.05).经NMU诱导后,iDC和mDC均能促进T淋巴细胞增殖(P＜0.01).[结论]在一定浓度范围内,NMU能够抑制猪树突细胞的凋亡,并提高其细胞活性和促进树突细胞刺激淋巴细胞增殖的功能,并能影响树突细胞细胞因子分泌,提示神经介素U参与了对猪免疫功能的调节.