草地贪夜蛾热激蛋白Hsc70基因克隆、表达谱及对不同环境胁迫的响应

为探讨草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda Hsc70基因对A区段紫外辐射(ultraviolet-A radiation,UV-A)及高、低温胁迫的响应,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆Hsc70基因并对其进行序列分析,利用实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR,RT-qPCR)技术分析不同龄期、不同组织及UV-A和高、低温胁迫下的表达量.结果 显示,草地贪夜蛾Hsc70基因(GenBank登录号:MT130717)开放阅读框为1 980 bp,编码659个氨基酸,蛋白质相对分子量为73.12 kD,等电点为5.23;其氨基酸末端序列为KDEL,属于内质网型热激蛋白.草地贪夜蛾Hsc70基因与鳞翅目昆虫Hsc70同源性高.草地贪夜蛾Hsc70表达量在2龄幼虫发育阶段和复眼中表达量最高.UV-A、高、低温胁迫对草地贪夜蛾Hsc70基因表达有明显的诱导作用,随着处理时间的延长,Hsc70基因表达量呈先增加后降低的趋势;UV-A胁迫下,草地贪夜蛾雌、雄成虫Hsc70基因表达量分别在120 min和60 min时达到峰值;36℃胁迫下,草地贪夜蛾雌、雄成虫Hsc70基因表达量分别在120 min和90 min时达到峰值;4℃胁迫下,草地贪夜蛾雌、雄成虫Hsc70基因表达量均在30 min时达到峰值.表明草地贪夜蛾Hsc70基因在草地贪夜蛾适应环境胁迫中发挥着作用.