热休克蛋白47对转化生长因子β1诱导肾小管上皮细胞合成细胞外基质的影响

目的：探讨热休克蛋白47（HSP47）对转化生长因子β1（TGF‐β1）刺激的肾小管上皮细胞（HK‐2）合成细胞外基质（ECM ）的影响。方法以10 ng／mL TGF‐β1刺激 HK‐2细胞0、12、24、48 h ，蛋白印迹法检测HSP47的表达，蛋白印迹法及Real‐time聚合酶链反应（PCR）法检测Ⅰ型胶原（ColⅠ）及Ⅳ型胶原（ColⅣ）的表达。然后转染HSP47小干扰RNA（siRNA）及阴性对照，后采用蛋白印迹法检测 HSP47的表达，蛋白印迹法及Real‐time PCR法检测ColⅠ和ColⅣ的表达。结果 TGF‐β1作用于HK‐2细胞后，HSP47蛋白呈时间依赖性表达上调（P＜0.05），同时ColⅠ和ColⅣ蛋白及mRNA呈时间依赖性表达上调（P＜0.05），转染 HSP47siRNA后，蛋白印迹法显示与对照组比，TGF‐β1组 HSP47表达增强（P＜0.01），与 TGF‐β1组比，HSP47siRNA组 HSP47表达降低（P＜0.01），对照组无明显变化（P＞0.05），蛋白印记及Real‐time PCR结果显示，与对照组相比，TGF‐β1组ColⅠ和ColⅣ表达明显上调（P＜0．01）；与 TGF‐β1组相比，HSP47siRNA组ColⅠ和ColⅣ表达明显下调（P＜0.05和 P＜0.01）；而 HSP47siRNA（－）组无明显的变化（P＞0.05）。结论 HSP47可促进 HK‐2细胞ECM合成，抑制 HSP47可延缓肾间质纤维化疾病进展。