miR-346在糖尿病肾病TGF-β介导的Smad信号通路中的作用

目的:观察miR-346在高糖环境下小鼠肾小球系膜细胞TGF-β介导Smad信号通路中的作用,探讨miR-346参与糖尿病肾病(DN)的发病机制.方法:体外高糖(25 mmol/L)下培养小鼠肾小球系膜细胞(MC),pGenesil-miR-346和重组TGF-β药物作为干预因素,分别设TGF-β药物刺激组(10、30 ng/mL)、TGF-β药物刺激+shRNA P53干扰组、阴性对照组.细胞免疫荧光检测细胞表型;Western法检测P53蛋白和Smad3/4蛋白的表达;实时荧光定量RT-PCR法检测mRNA表达.结果:(1)miR-346的表达可由P53通过调节miR-346基因中启动子来调节;(2)miR-346可调节Smad3/4的表达,其过程是TGF-β通过P53、miR-346通路从上游来调节的.结论:miR-346通过TGF-β/Smad信号通路调控糖尿病肾病相关基因表达,二者形成正反馈效应,在DN的发生和发展中起到非常重要的作用.