血管紧张素Ⅱ对鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞氧化应激的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对多巴胺能细胞损伤的影响及其机制.方法:体外培养CATH.a细胞,鱼藤酮和(或)AngⅡ处理细胞24 h.采用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测细胞存活率,蛋白印迹技术检测血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)和血管紧张素Ⅱ-2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)蛋白表达,流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,荧光定量PCR检测尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶亚基gp91岫和p67phox基因表达,免疫荧光检测gp91phox蛋白表达.结果:AngⅡ通过AT1R导致鱼藤酮诱导的CATH.a细胞存活率降低(P＜0.05).AngⅡ使NADPH氧化酶亚基gp91phox和p67phox表达增加(P＜0.05),并呈剂量依赖性促进细胞内ROS产生.AT1R阻滞剂氯沙坦和NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素使AngⅡ诱导的ROS产生减少(P＜ 0.01).结论:AngⅡ作用于AT1R,通过NADPH氧化酶产生ROS,促进鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞损伤,参与帕金森病的发生与发展.