重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂纯度的控制方法

目的 建立分析重组人TNK组织型纤溶酶原激活剂(recombinant human TNK tissue type plasminogen activator,rhTNK-tPA)纯度的方法.方法 单体、聚合体直接采用分子排阻色谱法(size-exclusion high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)测定;双链含量的检测需用二硫苏糖醇(DDT)打开二硫键,再采用分子排阻色谱法(SEC-HPLC)测定.色谱柱:TSKgel G3000SWXL;流动相:3％ NaH2PO4-0.1％SDS(pH6.8)水溶液;流速:0.3 mL·min-1;检测波长:214 nm;柱温:25 ℃;检测时间:50 min;进样量:10 μL.结果 方法的专属性和精密度良好;3批原液的单体含量为98.8％、98.9％、99.0％;聚合体的含量为12％、1.1％、1.0％;双链含量为8.0％、7.5％、7.5％.结论 此方法准确、全面,经方法学验证可严格控制本品质量.