LC-MS/MS法测定人血浆中氯胺酮及其代谢物去甲基氯胺酮对映异构体浓度及药代动力学研究

目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS法)测定人血浆中氯胺酮及其代谢物去甲基氯胺酮对映异构体浓度,并用于氯胺酮和右氯胺酮临床药动学研究.方法:血浆经固相萃取后,采用PLC-MS/MS测定.色谱柱为酸性糖蛋白结合硅胶柱(100 mm×4 mm,5μm),流动相为异丙醇-10 mmol·L-1醋酸胺溶液(氨水调pH至7.6～7.7)(6:94),流速0.5 mL·min-1,柱温28℃;质谱采用电喷雾离子化(ESI)及多重反应监测(MRM)模式;选择检测离子反应对为m/z 238→m/z 207(R-/S-氯胺酮),m/z 224-→m/z 207(R-/S-去甲基氯胺酮),m/z 291→m/z 230(内标甲氧氨苄嘧啶).结果:人血浆中氯胺酮对映异构体的线性范围为5～1 000ng·mL-1,最低定量限为5 ng·mL-1;代谢物去甲基氯胺酮对映异构体的线性范围为2.5～500 ng·mL-1,最低定量限为2.5 ng·mL-1.本方法专属性良好,氯胺酮对映异构体批内批间精密度均小于5％,去甲基氯胺酮对映异构体的批内批间精密度均小于7％.此检测方法应用于全麻腹腔镜手术受试者静脉注射盐酸氯胺酮注射液或盐酸右氯胺酮后的药代动力学研究中.21例患者单次静脉注射消旋体氯胺酮后,R-氯胺酮和S-氯胺酮半衰期分别为(4.06±1.75)h、(3.33±2.23)h;停药后即刻浓度c0分别为(3 427±2 866) ng·mL-1、(3 331±2 797) ng·mL-1;24 h曲线下面积AUC0～24h分别为(407±91)h·ng·mL-1、(361±87)h·ng·mL-1.代谢物R-N-去甲基氯胺酮和S-N-去甲基氯胺酮半衰期分别为(8.63±2.57)h、(8.73±2.93)h;达峰浓度Cmax分别为(100±22) ng· mL-1、(91±20)ng·mL-1;24 h曲线下面积AUC0～24h分别为(557±211)h·ng·mL-1、(515±167)h·ng·mL-1.结论:本方法准确,专属性强,灵敏度高,可满足实际临床研究的需要.