远志皂苷改善APP/PS1转基因小鼠认知功能损伤的机制研究

目的 探讨远志皂苷对阿尔兹海默病(AD)模型小鼠认知损伤的改善作用及可能的机制.方法 6月龄APP/PS1转基因小鼠18只,随机均分为远志皂苷治疗组(连续8周每天腹腔注射8 mg/kg远志皂苷)与生理盐水对照组(连续8周每天腹腔注射等体积生理盐水),同时选取同月龄野生型小鼠9只作为野生型对照组(连续8周每天腹腔注射等体积生理盐水).8周后采用Morris水迷宫法检测各组小鼠的学习记忆水平,免疫荧光法检测小鼠脑内海马区突触后致密蛋白-95(PSD-95)的表达,硫黄素染色检测海马区老年斑水平,ELISA检测海马区β-淀粉样多肽(Aβ42)含量,Western blotting分析海马区PSD-95表达水平以及tau蛋白Ser231、Ser214、Ser396位点的磷酸化水平.结果 在Morris水迷宫实验中,生理盐水对照组小鼠的逃避潜伏期自第2天起较野生型对照组小鼠明显延长(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠的逃避潜伏期自第3天起较生理盐水对照组明显缩短(P<0.05);与野生型对照组相比,远志皂苷治疗组小鼠的逃避潜伏期在前4天无明显改变(P>0.05),在第5天时逃避潜伏期明显延长(P<0.05).空间搜索实验发现,生理盐水对照组小鼠定位目标位置花费时间较野生型对照组明显延长(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠定位目标位置时间较生理盐水对照组明显减少(P<0.05),而与野生型对照组相比则无明显改变(P>0.05).生理盐水对照组小鼠穿越平台的次数较野生型对照组明显减少(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠穿越平台的次数大于生理盐水对照组(P<0.05),而与野生型对照组比较则无明显改变(P>0.05).生理盐水对照组小鼠海马PSD-95相对含量低于野生型对照组(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠海马PSD-95相对含量高于生理盐水对照组(P<0.05),但与野生型对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).与生理盐水对照组相比,远志皂苷治疗组小鼠海马区内老年斑数量明显减少(P<0.05).ELISA检测结果显示,与生理盐水对照组相比,远志皂苷治疗组小鼠海马区内Aβ42含量明显减少[(2.859±0.864)ng/mg vs.(5.154±0.735)ng/mg],差异有统计学意义(P<0.05).生理盐水对照组小鼠海马tau蛋白Ser231、Ser214、Ser396位点磷酸化水平高于野生型对照组(0.947±0.131 vs.0.540±0.076、0.832±0.161 vs.0.305±0.088、0.819±0.053 vs.0.338±0.052),差异均有统计学意义(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠脑组织tau蛋白Ser231、Ser214、Ser396位点磷酸化水平低于生理盐水对照组(0.568±0.051 vs.0.947±0.131、0.472±0.094 vs.0.832±0.161、0.452±0.071 vs.0.819±0.053),差异均有统计学意义(P<0.05);远志皂苷治疗组小鼠海马tau蛋白Ser214、Ser396位点磷酸化水平高于野生型对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 远志皂苷可上调AD小鼠PSD-95表达并改善认知损伤,其途径可能是通过减少Aβ沉积及tau蛋白的过度磷酸化来实现的.