miR-146a-5p在Notch2调控牙周膜干细胞成骨分化机制的作用研究

目的:探索miR-146a-5p在Notch2分子调控牙周膜干细胞向成骨细胞分化中的关键作用,为口腔疾病的治疗及组织工程修复提供基础的理论依据.方法:培养hPDLSCs,采用RT-PCR检测对其成骨诱导前后成骨分化相关基因ALP、OSX及Notch2基因水平、miR-146a-5p的表达变化;通过Western Blot检测hPDLSCs成骨诱导分化后14d成骨相关蛋白ALP、OSX以及Notch2改变;将miR-146a-5p转染hPDLSCs,通过RT-PCR及Westem Blot分别检测成骨相关基因ALP、OSX以及Notch2 mRNA蛋白水平.结果:RT-PCR检测结果表明,hPDLSCs成骨诱导7d、14d,ALP、OSX及Notch2 mRNA水平表达增高(P＜0.05),同时在蛋白水平上ALP、OSX、Notch2分子表达增高(P＜0.05);RT-PCR显示成骨诱导14d,miR-146a-5p表达下降;miR-146a-5p转染hPDLSCs后,成骨相关蛋白ALP、OSX以及Notch2表达降低(P＜0.05).结论:miR-146a-5p在hPDLSCs向成骨细胞方向分化过程中能够抑制Notch信号通路分子以及成骨相关基因ALP、OSX表达,参与hPDLSCs向成骨细胞方向分化.