实验性脉络膜新生血管中Rap1、鸟苷三磷酸-Rap1、血管内皮生长因子及β-连环蛋白的表达研究

目的 观察实验性脉络膜新生血管(CNV)中Rap1、鸟苷三磷酸-Rap1(GTP-Rap1)、血管内皮生长因子(VEGF)及β-连环蛋白(β-catenin)的表达.方法 42只棕色挪威大鼠随机分为空白对照组、模型组,分别为7、35只;均双眼入组.模型组大鼠氪离子激光光凝建立CNV模型.光凝后3、7、14、21、28 d行荧光素眼底血管造影(FFA)、脉络膜血管铺片检查,观察光凝后不同时间大鼠荧光素渗漏程度以及CNV面积的变化.蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测CNV中Rap1、GTP-Rap1、VEGF、β-catenin蛋白和mRNA表达.结果 FFA检查结果显示,光凝后14d,光凝斑出现大片圆盘状荧光素渗漏.激光共聚焦显微镜观察发现,与光凝后7d时CNV面积比较,光凝后14、21、28d时CNV面积增加,差异均有统计学意义(t=3.725、5.532、3.605,P＜0.05).Westemblot检测结果显示,与空白对照组比较,光凝后不同时间点,CNV中Rap1蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P=0.156);GTP-Rap1蛋白相对表达量显著降低,VEGF、β-catenin蛋白相对表达量明显增高,差异均有统计学意义(P=0.000).RT-PCR检测结果显示,与空白对照组比较,光凝后不同时间点,CNV中Rap1 mRNA相对表达量差异无统计学意义(P=0.645);β-catenin mRNA相对表达量差异均有统计学意义(P=0.000).7、14、21、28 d,GTP-Rap1、VEGF mRNA相对表达量差异均有统计学意义(P=0.000).结论 实验性CNV中GTP-Rap1表达较正常大鼠明显减少.