p38丝裂原活化蛋白激酶对人乳牙牙髓干细胞成骨分化能力的影响

目的:比较人乳牙牙髓干细胞(SHED)及牙髓干细胞(DPSC)增殖及成骨分化能力差异,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在人乳牙牙髓干细胞及牙髓干细胞中的表达及对干细胞成骨分化能力的影响.方法:有限稀释法分离培养SHED和DPSC,ELISA法检测IL-1[3、TNF-α分泌水平;PCR检测PCNA及CCND-1表达;两种干细胞常规培养及成骨诱导7d后进行ALP染色、实时定量PCR检测Runx2、OCN基因表达.采用Western blot检测两种细胞成骨诱导7d后p38及磷酸化p38(p-p38)的表达.使用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580干扰后Western blot验证抑制效果;在SB203580干扰后流式细胞仪检测两种细胞周期变化,Western blot检测细胞OCN、ALP表达.结果:SHED的PCNA、CCND-1、Runx2、OCN表达水平高于DPSC.SHED的p38表达量高于DPSC;成骨诱导后两种PDLSCs中的p-p38表达均升高,但p38表达水平有所降低.SB203580干扰后SHED的增殖指数及OCN和ALP表达水平显著降低.结论:SHED的增殖能力及成骨分化能力高于DPSC,p38 MAPK在调控SHED的生物学功能中发挥重要作用,抑制p38后SHED的增殖及成骨分化能力也被显著抑制.