斑点型P OZ蛋白对膀胱癌T24细胞增殖和迁移能力的影响

目的：探讨RNA干扰斑点型POZ蛋白（SPOP）基因表达对人膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法采用阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine 2000将靶向沉默SPOP基因的小干扰RNA（ siRNA）序列siRNA1和siRNA2分别转染至T24细胞株（ siRNA1组和siRNA2组），设转染随机序列的T24细胞为对照组，采用实时定量逆转录聚合酶链反应（ qRT?PCR）和Western blotting分别检测各组转染48 h后的SPOP mRNA及蛋白水平，细胞增殖活性检测试剂盒（ CCK?8）检测细胞体外增殖活力，Transwell迁移试验及划痕试验观察各组的迁移能力。结果对照组、siRNA1组和siRNA2组的SPOP mRNA相对表达量为1?012±0?025、0?281±0?023和0?274±0?053，蛋白相对表达量为0?712±0?153、0?358±0?073和0?317±0?084，siR?NA1组和siRNA2组的SPOP mRNA和蛋白水平均低于对照组（ P＜0?05），siRNA1组和siRNA2组SPOP mRNA和蛋白水平的差异无统计学差异（ P＞0?05）；与对照组比较， siRNA1组和 siRNA2组的增殖活性升高，差异有统计学意义（ P＜0?05），且siRNA1组和siRNA2组的增殖率随转染时间的延长而增加（ P＜0?05）；Transwell迁移试验结果显示siRNA1组和siRNA2组的穿膜细胞数分别为（128?6±9?3）个和（134?5±8?6）个，均高于对照组的（92?5±8?4）个，差异有统计学意义（P＜0?05）；划痕试验结果显示siRNA1组和siRNA2组的划痕愈合率为（89?1±4?5）％和（93?7±5?1）％，均高于对照组的（32?6±2?8）％，差异有统计学意义（ P＜0?05）。结论 SPOP与膀胱癌的恶性行为有关，可能发挥抑癌基因的作用，如抑制增殖及迁移。