Tat-SmacN7融合肽对H460细胞辐射增敏机制研究

目的:探讨Tat-SmacN7融合肽对人非小细胞肺癌H460细胞辐射增敏的作用及其机制.方法:WST-1法检测Tat-SamcN7对H460细胞的毒性作用,细胞克隆实验观察Tat-SamcN7对H460细胞的辐射增敏作用,流式细胞术检测H460细胞的凋亡率,ELISA法检测H460细胞的Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性.结果:0.01～100 μmol/L的Tat-SmacN7融合肽与H460细胞共培养,细胞存活率均＞80％;20 μmol/L的Tat-SmacN7融合肽与H460细胞共培养,对细胞的辐射增敏比为1.63;Tat-SmacN7(20 μmol/L)对细胞凋亡[(10.87±0.45)％]有主效应,F=54.389,P＜0.001;4 Gy照射对细胞凋亡[(19.83±0.75)％]有主效应,F=641.516,P＜0.001;二者有交互效应,F=65.756,P＜0.001.Tat-SmacN7对细胞Caspase-3活性(1.418±0.064)有主效应,F=67.029,P＜0.001;照射对细胞Caspase-3活性(1.188士0.102)有主效应,F=29.509,P=0.001;两者有交互作用,F=11.328,P=0.01.Tat-SmacN7对细胞Caspase-8活性(1.867±0.208)有主效应,F=149.705,P＜0.001;照射对细胞Caspase-8活性(1.227±0.123)有主效应,F=30.418,P=0.001;两者有交互作用,F=10.663,P=0.011.Tat SmacN7对细胞Caspase9活性(1.672±0.075)有主效应,F=127.027,P＜0.001;照射对细胞Caspase-9活性(1.279±0.141)有主效应,F=44.281,P＜0.001;两者有交互作用,F=9.782,P=0.014.结论:Tat-SmacN7单独作用对非小细胞肺癌H460细胞没有明显毒性作用,但能增强H460细胞对辐射的敏感性,具有辐射增敏作用,与其能增强细胞内Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性相关.