母系表达基因3在小儿先天性巨结肠的表达及意义

目的 观察母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)在小儿先天性巨结肠(Hirschsprung's disease,HSCR)病变组织中的表达情况,并通过过表达MEG3对人神经母细胞瘤细胞SK-N-BE(2)的影响,探讨MEG3在HSCR中的作用机制及意义.方法 用RT-qPCR方法检测17例HSCR患儿病变结肠组织和17例正常结肠组织中MEG3的表达量,应用细胞培养及转染技术,在SK-N-BE(2)细胞中转染MEG3过表达质粒,并设立高表达组、空载体组及对照组,应用CCK-8、Edu、Transwell、流式细胞实验等方法检测过表达MEG3对SK-N-BE(2)细胞增殖、克隆、侵袭及凋亡的影响.结果 RT-qPCR实验中,HSCR组中MEG3的表达量为1.783±0.249,对照组为0.962±0.101;Edu细胞增殖实验中,空载体组增殖细胞数为(69.7±11.3)个,对照组为(74.8±9.6)个,MEG3组为(37.5±8.1)个;Transwell实验中,空载体组跨膜细胞数为(67.7±8.1)个,对照组为(70.5±10.3)个,MEG3组为(31.6±5.2)个;细胞凋亡实验中,空载体组细胞凋亡率为(24.99±2.78)％,对照组为(22.11±2.58)％,MEG3组为(42.75±5.95)％.HSCR患儿病变结肠组织中MEG3表达量较正常结肠组织中表达量明显升高(P＜0.01),MEG3过表达质粒转染SK-N-BE(2)细胞的增殖、克隆以及侵袭能力与空载体组及对照组比较明显降低(P＜0.01),而凋亡明显增加(P＜0.01).结论 MEG3在HSCR患儿病变组织中表达异常,可能影响SK-N-BE(2)的增殖、侵袭和凋亡,参与巨结肠发病.