自然杀伤细胞与丙型肝炎病毒感染的Huh7．5细胞体外共培养后的功能变化

目的：探讨体外丙型肝炎病毒（ HCV）感染对NK细胞功能产生的影响及其可能的机制。方法利用质粒JC1-Flag2体外转录得到的HCV感染性颗粒（HCVcc）以MOI4.8感染Huh7.5细胞（Huh7.5-HCVcc），与健康人外周血分离得到的NK细胞进行共培养。与Huh7.5-HCVcc细胞共培养前后，采用ELISA法和MTT比色法分别检测NK分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-10的水平和细胞杀伤活性，以评估HCV感染对NK细胞功能的影响。结果与MOI4.8的Huh7.5-HCVcc细胞共培养，NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α和IL-10水平受到抑制，其中IFN-γ在共培养6 h（P<0.001）、9 h（P<0.001）、12 h（P<0.001）受到显著抑制，TNF-α在共培养6 h（P<0.001）、9 h（P<0.001）、12 h（P=0.001）受到显著抑制， IL-10在共培养6 h（P<0.001）、9 h（P=0.006）受到显著抑制；且NK细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-10的功能均在共培养6 h受到的抑制效应最大，平均抑制率分别为24.1％、20.7％和24.3％。NK细胞杀伤活性在共培养6 h（ P=0.023）受到抑制，平均抑制率为16.6％。结论在体外与MOI4.8的Huh7.5-HCVcc细胞共培养，NK细胞分泌细胞因子（IFN-γ、TNF-α和IL-10）和细胞杀伤功能均受到抑制，且在不同时间点受到的抑制程度不同，提示NK细胞在HCV感染的不同阶段可能起到不同的作用。