基于IgY抗体检测日本血吸虫循环抗原的间接红细胞凝集试验的建立

目的 建立基于IgY的血吸虫循环抗原的间接红细胞凝集试验(indirect hemagglutination test,IHA)并初步探讨IgY在诊断日本血吸虫病中的应用价值.方法 以日本血吸虫卵可溶性虫抗原(soluble egg antigen,SEA)免疫海蓝蛋鸡,获得抗SEA的IgY抗体.取人O型红细胞醛化、鞣化,形成鞣化后红细胞,并分别用磷酸盐、碳酸盐和柠檬酸盐缓冲液稀释抗SEA-IgY抗体,以确定IgY致敏红细胞最佳缓冲液.将IgY溶解于最佳的缓冲液中致敏鞣化后红细胞,形成IgY红细胞检测液,用此检测液分别检测感染30、20、10条日本血吸虫尾蚴和正常小鼠血清各10份,初步检测不同感染度小鼠血清的循环抗原.结果 pH7.2磷酸盐缓冲液溶解的IgY所得致敏红细胞检测血清最佳,效价可达1∶320.用此IgY-IHA法检测中、高感染度血清(感染20条和30条日本血吸虫尾蚴)阳性率为100％,低感染度血清(感染10条日本血吸虫尾蚴)阳性率为70％,对照组10只小鼠血清全为阴性,特异性为100％.结论 建立了IgY-IHA法,此法检测日本血吸虫病循环抗原具有较高的敏感性.