自噬和p53凋亡刺激蛋白在横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤模型中的表达趋势

目的:观察自噬相关蛋白和p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating protein of p53,ASPPs)在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)早期的表达变化,初步探讨自噬相关蛋白和ASPPs是否可能成为AKI早期损伤生物标志物.方法:建立横纹肌溶解致AKI大鼠模型,将74只雄性SD青年大鼠随机分为假手术组(Sham),甘油模型组;模型组大鼠一次性双下肢肌肉注射50％甘油8 ml/kg,Sham组相同途径注射生理盐水8 ml/kg,造模前大鼠禁水24h;在给药6h、12 h、1、2、3、5、7d时检测大鼠Scr、BUN、Cys C和肌酸激酶(creatine kinase,CK)水平;光镜观察大鼠肾脏病理变化;透视电镜观察大鼠肾小管上皮细胞超微结构变化及自噬体的情况;免疫印迹法检测肾脏组织Atg5-Atg12、Beclin 1、LAMP-2、p62、p53及iASPP和ASPP1表达情况.结果:青年大鼠暴露于甘油6h时,与Sham组比较,顺铂模型组大鼠Scr、BUN、Cys C、CK水平显著升高(P＜0.05),Scr、BUN在2d时达峰;光镜检查发现肾小管损害明显加重;电镜结果显示,与Sham组比较,顺铂组大鼠平均自噬体数量明显增多;甘油诱导后6h开始,肾脏组织iASPP蛋白表达明显减少(P＜0.05),LC3、Atg5-Atg12、Beclin 1、LAMP-2、p62、p53及ASPP1等蛋白表达即出现明显升高(P＜0.05).与Sham组比较,LC3蛋白表达6h达峰后逐渐下降,至5d时达最低值,后逐渐升高;p53蛋白表达12 h达峰后逐渐下降;p62蛋白表达1d达峰后逐渐下降;Atg5-Atg12、Beclin 1、LAMP-2及ASPP1等蛋白表达3d达峰后逐渐下降;iASPP蛋白表达6h开始减少,1d时达最低值后逐渐升高.结论:自噬和ASPPs在AKI发生早期即可出现并参与了AKI的发生发展.自噬相关蛋白和ASPPs有望成为AKI更早期的损伤标志物,可能是AKI早期干预的新靶点,但仍需更深入的研究.