人参皂苷诱导黑色素瘤细胞B16-BL6凋亡的机制

目的 探讨人参皂苷诱导黑色素瘤细胞B16-BL6凋亡的机制.方法 培养黑色素瘤细胞B16-BL6,5、10、20、40 μg/ml的人参皂苷作用于黑色素瘤细胞B16-BL6 0、12、24、48、72 h,胆囊收缩素(CCK)8试验检测人参皂苷对细胞增殖的影响;10、20、40 μg/ml的人参皂苷作用于黑色素瘤细胞B16-BL6 48 h后,流式细胞仪检测人参皂苷对细胞凋亡的影响;Western印迹检测与凋亡相关蛋白的表达.结果 随着时间的延长和浓度的增加,人参皂苷对细胞的抑制率增加,表现出时间和浓度的依赖性.72 h后,人参皂苷对细胞的抑制率到了平台期,用5 μg/ml的人参皂苷处理黑色素瘤B16-BL6细胞,细胞的抑制率较低,因此后期选择10、20、40 μg/ml的人参皂苷为研究对象,用10、20、40 μg/ml的人参皂苷作用于黑色素瘤细胞B16-BL6 48 h后,各浓度组早期凋亡和晚期凋亡的细胞显著高于对照组,且呈剂量依赖性(P<0.01).随着人参皂苷浓度的增加,Bax蛋白表达量增加,而Bcl-2蛋白表达量减少,两者之间的比例增加,而且呈剂量依赖性.随着人参皂苷浓度的增加,细胞色素(Cyt)C和细胞凋亡诱导因子(AIF)含量增加,且呈剂量依赖性.结论 人参皂苷抑制黑色素瘤细胞B16-BL6增殖,促进细胞凋亡,其凋亡机制可能与Bcl-2家族Bcl-2和Bax两者之间的比例改变、线粒体膜通透性改变、促使一些凋亡因子的释放有关.