肝癌高表达转录本调控microRNA613促进肝癌细胞增殖的机制研究

目的: 研究肝癌高表达转录本 (highly up-regulated in liver cancer, HULC) 调控微小 RNA613 (microRNA613,miR-613)促进肝癌细胞增殖的作用机制. 方法:①在HepG2肝癌细胞株中,过量或抑制表达HULC,通过实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和荧光素酶报告基因系统检测miR-613的表达量和活性,分析HULC与miR-613之间的相互关系;②通过高通量表达芯片筛查miR-613作用的靶基因,在HepG2细胞株中应用化学合成的miR-613模拟剂(mimic) 和抑制剂(inhibitor),用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法分别检测靶基因和靶蛋白的表达情况;③HULC和miR-613协同作用于肝癌细胞后,用流式细胞仪和软琼脂克隆形成试验观察肝癌细胞周期变化和克隆形成能力. 结果:①在肝癌细胞中,HULC可调控miR-613的表达,随着HULC表达量的增加,miR-613表达和活性均降低;②Src基因是miR-613作用的下游靶基因之一;③高表达HULC或抑制miR-613表达可促进肝癌细胞周期改变和克隆形成.结论:肝癌细胞中HULC可调控miR-613表达,通过Src基因相关的细胞信号转导途径,改变肝癌细胞的细胞周期等生物学特性.