连接蛋白 Cx43参与冠状动脉平滑肌细胞的异质性促进冠脉再狭窄

目的：研究猪冠状动脉平滑肌细胞异质性与连接蛋白 Cx43关系，进一步阐明连接蛋白 Cx43在冠状动脉再狭窄发生中的作用。方法分别培养正常及支架术后猪原代冠状动脉平滑肌细胞，正常组应用血小板源生长因子（PDGF-BB）进行诱导，两组细胞分别进行电子显微镜观察细胞形态及结构变化，采用 Western Blotting 方法及实时荧光定量 PCR 测定 Cx43、Cx40、α-SMA、S100A4蛋白和 mRNA 表达；然后诱导组应用 Cx43阻断剂进行干预，再次检测上述指标变化。结果正常冠状动脉平滑肌细胞可见：纺锤型（spindle-shaped，S-SMC）和长菱形（rhomboid，R-SMC）两类，以 S-SMC 为主，其内 Cx40、α-SMA 有较高的蛋白和 mRNA 表达，而 Cx43表达较少；正常组经 PDGF-BB 诱导后细胞由 S-SMC 向 R-SMC 转变，同时伴随 Cx43表达上调，而 Cx40表达明显下降；通过反义 RNA 降低 Cx43表达，这种变化受抑制，并且 S-SMC 细胞保持原有形态，同时表达 a-肌动蛋白，支架组平滑肌细胞以 R-SMC 为主，Cx43、S100A4有较高的蛋白和 mRNA 表达。结论冠状动脉平滑肌细胞表型变化与连接蛋白 Cx43表达密切相关，连接蛋白 Cx43可能参与冠脉再狭窄的过程。